Abstract:
A espécie suína (Sus scropha domesticus) possui relevância nos âmbitos da pesquisa, da
xenotransplantação e da produção de carnes. O resfriamento de sêmen é capaz de
reduzir o metabolismo celular e possibilitar o armazenamento dos gametas, sendo
auxiliar durante práticas de reprodução assistida. Contudo, os espermatozoides suínos
são sensíveis ao estresse oxidativo gerado durante o processo de resfriamento. O 2,4
dinitrofenol (DNP) poderia gerar o desacoplamento mitocondrial reduzindo o estresse
oxidativo e prolongando indiretamente a viabilidade e capacidade fertilizante de
espermatozoides suínos resfriados pela diminuição de espécies reativas de oxigênio. O
objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do desacoplamento mitocondrial
induzido pelo DNP e os efeitos desse desacoplamento sobre as de fluidez e integridade
de membrana plasmática, funcionalidade de mitocôndria, motilidade espermática, além
dos parâmetros de estresse oxidativo de lipoperoxidação e produção de espécies reativas
de oxigênio, durante o resfriamento a 17 °C de 24 até 96 horas. Utilizou-se 22
ejaculados expostos ao diluente Betsville Thawing Solution (BTS) (controle) e ao
mesmo diluente acrescido das concentrações de 0,01 µM (T1); 0,1 µM (T2); 1,0 µM
(T3) e 10 µM (T4) de DNP. Através do teste de Shapiro-Wilk as variáveis que não
apresentaram normalidade, tiveram suas médias comparadas pelo teste de KruskalWallis.
As análises estatísticas demonstraram que o DNP não se diferiu do controle
independente do tempo de armazenamento, para nenhuma das variáveis analisadas.
Possivelmente, a falta de ação sobre as mitocôndrias, ou seja, a não promoção do
desacoplamento mitocondrial foi o motivo principal para a falta dos efeitos do DNP.
Acredita-se que a utilização do DNP em temperaturas mais elevadas por estas
promoverem aumento da fluidez de membrana e/ou o aumento das concentrações de
DNP poderiam gerar efeitos significativos sobre as mitocôndrias e demais variáveis
analisadas. Finalmente, o DNP nas concentrações testadas não se diferiu do controle em
todas as variáveis analisadas independente do tempo de armazenamento.
The swine spermatozoa are sensitive to oxidative stress generated during the cooling
process. 2, 4 dinitrophenol (DNP) could generate mitochondrial uncoupling, reducing
oxidative stress and thus, acting indirectly prolonging the viability and the fertilizing
capacity of swine spermatozoa cooled. The aim of this study was to evaluate the effects
of uncoupling mitochondrial induced by DNP and the effects of this uncoupling on the
variables of fluidity and integrity of plasma membrane, mitochondrial functionality,
sperm motility, beyond of oxidative stress parameters of lipid peroxidation and
production of reactive oxygen species, in swine spermatozoa during cooling to 17°C
from 24 up 96 hours. Was used 22 ejaculates exposed to extender Betsville Thawing
Solution (BTS) (control) and at the same diluent increased concentrations of 0.01 mM
(T1), 0.1 mM (T2), 1.0 mM (T3) and 10 mM (T4) of DNP. The Shapiro Wilk test
indicated absence of normality, soon means were compared by the Kruskal - Wallis test.
Statistical analysis showed that DNP does not differ from the control independent of
storage time, for any of the variables. Possibly, the lack of action on the mitochondria,
in other words, the inability to dissipate the proton gradient generated the inability of
DNP to reflect on the remaining variables. It is believed that the DNP could produce
significant effects if used in higher temperatures, due to increased membrane fluidity
and/or the use of higher concentrations. Finally, the DNP in concentrations tested did
not differ from control for all variables independent of storage time.
