Mecanismos de acumulação do cobre em células branquiais do marisco Mesodesma mactroides

Abstract

No presente estudo, a cinética de acumulação do cobre foi caracterizada em células branquiais isoladas do marisco Mesodesma mactroides usando duas técnicas diferentes de medida da concentração de cobre: espectrometria de absorção atômica (EAA) e fluorescência. Em uma concentração ambientalmente relevante de cobre (1 uM Cu), avaliou-se o envolvimento de diferentes mecanismos de transporte (canais de Na+, K+ e Cl-, co-transportadores Na+/K+2Cl- e Na+/Cl-, trocadores Na+/Ca2+, Cl-/HCO3- e Na+/H+) e enzimas associadas (Na+/K+-ATPase, V-ATPase e anidrase carbônica) através de diferentes ferramentas farmacológicas. Os resultados mostraram que uma cinética de acumulação do cobre do tipo saturação (mediada por transportadores) ocorre em baixas e concentrações ambientais relevantes de cobre (0-5 uM Cu), enquanto uma cinética do tipo linear (difusão) é observada em maiores concentrações de cobre (4-40 uM Cu). A toxicidade do cobre em células branquiais também é demonstrada quando ocorre uma saturação dos sítios de ligação e o influxo difusivo de cobre acontece. Além disso, as células branquiais se mostraram sensíveis aos bloqueadores dos canais de Na+ e Cl- e do trocador Na+/H+, sugerindo a importante participação destes mecanismos de transporte na regulação do volume, da concentração iônica e/ou do pH celular. Os dados do presente estudo oferecem evidências indiretas que o cobre entra nas células branquiais do marisco M. mactroides através do trocador Na+/H+, atraído pela eletronegatividade citoplasmática.