Giardia lamblia: diagnóstico com o emprego de métodos microscópicos e enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)

Abstract

O protozoário Giardia lamblia é um dos agentes etiológicos de diarreia em crianças no Brasil. Seu diagnóstico pode tornar-se difícil em consequência da baixa sensibilidade dos métodos usualmente empregados e por causa da eliminação intermitente dos cistos pode produzir resultados falso-negativos. Por essa razão, foi desenvolvido um ensaio imunoenzimático (ELISA) para pesquisa de antígenos de G. lamblia em fezes. Este imunoensaio tem sido descrito na literatura como um método simples, sensível e específico quando aplicado para o diagnóstico de diversas parasitoses. Assim, este estudo objetivou comparar a técnica de ELISA com os métodos coproscópicos de centrífugo-sedimentação (Técnica de Ritchie) e centrífugo-flutuação (Técnica de Faust), visando demonstrar a importância de um método com maior sensibilidade. Foram examinadas 158 amostras de fezes de crianças, de 0 a 12 anos, em uma creche municipal pública de Rio Grande, no Rio Grande do Sul, Brasil. Os resultados referentes à comparação entre as técnicas mostraram que a técnica de ELISA tem 3,0 vezes mais chances de detectar amostras positivas de G. lamblia que o método de centrífugo-flutuação. Quando comparada com o método de centrífugo-sedimentação, a técnica de ELISA demonstrou ter 3,4 vezes mais chances de detectar amostras positivas para G. lamblia.Concluiu-se que a técnica de ELISA desenvolvida mostrou-se mais eficiente que as técnicas adotadas na rotina laboratorial para o diagnóstico desta parasitose, podendo ser aplicada tanto para o diagnóstico individual como em avaliações epidemiológicas, já que permite o processamento de várias amostras simultaneamente.

The protozoan Giardia lamblia is one of the etiological agents of diarrhea in children in Brazil, and diagnosis may be difficult due to low sensitivity of the methods commonly used, due the intermittent liberation of cysts, which may lead to false-negative results. Thus, an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for detection of G. lamblia antigens in fecal samples, considering that this immunoassay has been described to be simple, sensitive and specific when applied to diagnose various parasitic diseases. Thus, this study aimed to compare the ELISA technique with single stool sample to examination methods using centrifugal sedimentation (Ritchie technique) and centrifugation-flotation (Faust technique), intending to demonstrate the importance of a method with greater sensitivity. Fecal samplesfrom a total of 158 children aged 0-12 years, were examined in a public municipal nursery in the city of Rio Grande, Rio Grande do Sul, Brazil. The comparative results of the investigated techniques showed that ELISA has 3.0 times more chance than centrifugationflotation, and 3.4 times more chance than centrifugal sedimentation to detect positive samples of G. lamblia. Overall, it was concluded that the ELISA was more efficient than the routine laboratory techniques for the diagnosis of giardiasis, and it may be used for both individual and epidemiological assessments, as the technique allows for processing of multiple samples simultaneously.