Caracterização do padrão de expressão de isoformas da família p53 em mexilhões Mytilus edulis expostos ao chumbo

Abstract

Proteínas da família p53 atuam principalmente na resposta contra danos ao DNA. Apesar de bastante informação estar disponível a respeito desta família de proteínas para vertebrados, principalmente mamíferos, o conhecimento para invertebrados ainda é incipiente. Com o objetivo de analisar se o chumbo tem a capacidade de alterar os níveis de mRNA das isoformas p53, TAp63/73 e Np63/73 em bivalves, mexilhões Mytilus edulis foram expostos ao chumbo (0,01 e 0,1mg Pb/L) durante 1, 3 e 7 dias. Considerando a distribuição tecidual destas isoformas, a p53 foi detectada em todos os tecidos analisados (brânquias, músculo e glândula digestiva), enquanto que as isoformas TAp63/73 e Np63/73 apenas foram encontradas nas brânquias e no músculo. Após 3 dias de exposição, a concentração de 0,1 mg/L foi capaz de aumentar significativamente a transcrição da p53 na glândula digestiva dos animais, no entanto, não foram observadas diferenças na expressão desta isoforma nas brânquias e músculo. Para a isoforma TAp63/73, uma diminuição na transcrição do mRNA foi observada nas brânquias após 1 e 7 dias de exposição para a concentração de 0,1mg/L, já no músculo, não houve alteração significativa desta isoforma. Em relação à Np63/73, a diminuição significativa dos níveis de mRNA foi observada após 1, 3 e 7 dias nas brânquias e após 1 dia de exposição no músculo, sendo ambas as concentrações suficientes para influenciar os níveis de mRNA neste tecido. Por mais que poucas informações sejam encontradas na literatura sobre esse assunto em invertebrados, acredita-se que a família da p53 atue de modo similar ao encontrado para os vertebrados, onde um balanço entre a expressão das isoformas é observado, assim como uma expressão tecido-especifica.

Lead is a persistent environmental pollutant that can induce DNA damage and changes in expression pattern of many genes. Among them, genes related to p53 family are central in cellular responses induced by DNA damage. So, this study was carried out with the aim of analyze the effects of lead on the expression pattern of p53, TAp63/73 and Np63/73 isoforms in different tissues of the mussel Mytilus edulis. Animals were exposed to lead (0, 0.01 and 0.1 mg/L Pb) and the tissue-specific expression was evaluated at 1, 3 and 7 days of exposure. Considering the tissue distribution of these isoforms, p53 was detected in all tissues analyzed (gills, digestive gland and muscle), while TAp63/73 and Np63/73 isoforms were detected only in gills and muscle. After 3 days of exposure to 0.1 mg Pb/L, an up-regulation (p<0.05) in mRNA levels of p53 in the digestive gland was observed when compared to control mussels. No differences were observed for mRNA levels of this isoform in gills or muscle. Conversely, mRNA levels of TAp63/73 isoform were down-regulated only in gills of animals exposed for 1 and 7 days to lead (0.1 mg/L). Np63/73 isoform was also down-regulated by lead exposure in gills (after 1, 3 and 7 days) and muscle (after 1 day of exposure). Accordingly with the results found in this study, the expression is tissue-specific and the balance between the isoforms may be crucial against stressful conditions. Moreover, this family of proteins may have similar features with vertebrates.