Efeito da combinação entre radiação UVB e ômega 3 e interação entre ciplastina e ômega 3 em células de melanoma

Abstract

Mundialmente, a incidência de melanoma tem aumentado de forma preocupante, e uma terapia eficaz para a doença metastática ainda inexiste, dada a sua resistência intrínseca/extrínseca. Ácidos graxos poliinsaturados ômega 3 (PUFA ômega 3) têm atraído um crescente interesse como promissores adjuvantes na prevenção e tratamento do câncer. Assim, as propostas deste trabalho foram avaliar o efeito do ácido -linolênico (ALA) na exposição à radiação ultravioleta B (UVB) em uma linhagem melanocítica normal (Melan-a) e em uma linhagem melanocítica maligna (B16F10), investigar a atividade da glicoproteína P (Pgp), que é equívoca para o melanoma, e ainda analisar o efeito do tratamento combinado de cisplatina (CPt), e um PUFA ômega 3, ácido docosahexaenóico (DHA), em sensibilizar células de melanoma humano (WM266-4) e murino (B16F10) à ação antineoplásica da CPt. Também investigamos os efeitos do DHA em proteínas relacionadas à resposta de resistência à CPt no melanoma, ERCC1, DUSP6 e p-ERK. ALA apresentou um efeito inibitório na proliferação de células B16F10, e teve um mínimo efeito na Melan-a. ALA e UVB combinados mostraram, de uma forma dose e tempo dependente, uma ação fotodinâmica nas células B16F10 e um efeito fotoprotetor na Melan-a. Demonstramos que estes efeitos não tiveram a participação do processo de estresse oxidativo, uma vez que não foram observadas diferenças em 48 h após os tratamentos. Adicionalmente, ambas as células apresentaram uma expressiva atividade de Pgp. Mostramos ainda que o DHA apresentou um efeito inibitório e antiinvasivo em células de melanoma. DHA também reverteu os efeitos da CPt nas proteínas estudadas. Inclusive, outro PUFA ômega 3, o ácido eicosapentaenóico (EPA), foi também capaz de exercer efeitos similares na expressão de ERCC1, DUSP6 e p-ERK, revertendo a resposta de resistência em células de melanoma.

Recently, omega 3 polyunsaturated fatty acids (omega 3 PUFA) are attracting interest as potential adjuvants forcancer prevention and treatment. There is evidence about photoprotection in normal cells, but no previous studies have evaluated it in tumoral cells. Melanoma is notoriously resistant to chemotherapeutic agents and the involvement of P-glycoprotein (Pgp) in this process is unclear yet. So, this study investigated a photoprotective activity attributed to -linolenic acid (ALA), in normal melanocytic cells (Melan-a) and a photodynamic action in tumoral melanocytic cells (B16F10) exposed to UVB radiation, as well as analysed the activity of Pgp. ALA exhibited an antiproliferative effect in B16F10 cells, and had minimal effect in Melan-a cells. ALA and UVB combined showed, in a dose and time dependent manner, a photodynamic action in B16F10 cells and a protective effect in Melan-a cells. ALA and UVB combined or UVB alone induced an accumulation of cell lines at S/G2/M phase. In addition, the combination and UVB alone induced cell death in 24h in both cells, and in 48 h, ALA attenuated this effect. Besides that, ALA did not alter ROS levels in both cells exposed to UVB radiation. Interestingly, both studied cell lines presented a high activity of Pgp