Dimetilsulfóxido, metanol e metilglicol na criopreservação espermática do Suruvi, Steindachneridion scriptum

Abstract

O Steindachneridion scriptum, peixe nativo brasileiro, está em perigo de extinção devido à fragmentação de seu habitat. Com isso, a conservação ex situ a partir do banco de germoplasma utilizando a criopreservação permite a proteção e recuperação dessa espécie. O objetivo do trabalho foi analisar o efeito dos álcoois dimetilsulfóxido (DMSO), metanol e metilglicol nas concentrações de 5%, 7,5%, 10%, 12,5% e 15% na criopreservação espermática do S. scriptum. Cada tratamento foi diluído em Betsville Thawing Solution (BTS) e todas amostras foram avaliadas pelo Computer Assisted Sperm Analysis (CASA) além de citometria de fluxo. As melhores médias de motilidade total e progressiva, referem-se ao metilglicol em todas concentrações e de metanol em 7,5 e 10% (P < 0.05), já o maior período de motilidade ao DMSO 5; 7,5 e 15%, além do metanol 5% e metilglicol em 7,5; 10; 12,5 e 15% (P < 0.05). Além metilglicol em 7,5% (P < 0.05) se destacar nas demais análises da cinética. Já produção de ROS diminuiu apenas com metilglicol 5% comparado ao DMSO 5% (P < 0.05), porém a LPO e a fragmentação do DNA não diferiram entre si (P > 0.05). O DMSO 5; 7,5 e 10%, conferiram maior integridade celular comparado ao metilglicol 5% (P < 0.05). No entanto, o metanol 12,5% possibilitou menor fluidez de membrana comparado ao DMSO 12,5% (P < 0.05), porém sua funcionalidade foi superior com DMSO 10 e 12,5% (P < 0.05) comparado ao metanol 10% e metilglicol 5% (P > 0.05). Por fim, as maiores funcionalidades mitocondriais foram obtidas com DMSO 12,5 e 15% diferenciando-se apenas do metilglicol 5% (P < 0.05). Dessa forma, o BTS adicionado de 7,5% de metilglicol foi o tratamento mais eficiente na criopreservação espermática do S. scriptum.

Steindachneridion scriptum, Brazilian native fish, is in danger of extinction due to the fragmentation of its habitat. With this, the ex situ conservation from the germplasm bank using cryopreservation allows the protection and recovery of this species. The objective of the present work was to analyze the effect of 5%, 7,5%, 10%, 12,5% and 15% concentrations on the sperm cryopreservation of S. scriptum, with the effect of the dimethylsulfoxide (DMSO), methanol and methylglycol alcohols. Each treatment was diluted in Betsville Thawing Solution (BTS) and Computer Assisted Sperm Analysis (CASA) evaluated all samples in addition to flow cytometry. The best means of total and progressive motility, refer to methylglycol in all concentrations and methanol in 7.5 and 10% (P <0.05), already the longest period of motility to DMSO 5; 7.5 and 15%, in addition to methanol 5% and methylglycol in 7.5; 10; 12.5 and 15% (P <0.05). Besides methylglycol in 7.5% (P <0.05), it stands out in the other kinetic analyzes. ROS production decreased only with methylglycol 5% compared to DMSO 5% (P <0.05), but the LPO and DNA fragmentation did not differ among them (P> 0.05). DMSO 5; 7.5 and 10%, conferred higher cellular integrity compared to methylglycol 5% (P <0.05). However, methanol 12.5% allowed lower membrane fluidity compared to DMSO 12.5% (P <0.05), but its functionality was higher with DMSO 10 and 12.5% (P <0.05) compared to methanol 10% and 5% methylglycol (P> 0.05). Finally, the major mitochondrial functionalities were obtained with DMSO 12.5 and 15% differing only from 5% methylglycol (P <0.05). Thus, BTS added of methyl glycol 7.5% was the most efficient treatment in sperm cryopreservation of S. scriptum.