Abstract:
Na primeira etapa deste estudo, foram realizados experimentos para avaliar o
crescimento e sobrevivência de camarões nativos do sul do Brasil, da espécie
Farfantepenaeus paulensis, cultivados em diferentes salinidades. Para isso, grupos de
200 PL47 (pós-larvas com idade de 47 dias), com peso inicial médio (±DP) de 0,022 g
(±0,008), produzidas na Estação Marinha de Aquacultura (FURG) foram cultivadas
durante 60 dias em gaiolas (1m3
) suspensas em dois tanques com 20.000 L de água, nas
salinidades 5 e 30. Os níveis de salinidade foram considerados diferentes tratamentos, os
quais contaram com três repetições cada. Os camarões foram alimentados ad libitum, com uma ração comercial fornecida duas vezes ao dia em bandejas. As médias (±DP) de
temperatura, pH, oxigênio dissolvido e amônia total (N-AT) foram 25,5C (±1,9); 8,07
(±0,13); 5,16 mg/L (±1,07) e 0,042 mg/L (±0,013), respectivamente, sendo estes valores
considerados aceitáveis para esta espécie. Ao final do experimento, os camarões foram
contados e pesados, apresentando uma sobrevivência média, para ambos tratamentos, de 97%. Os resultados obtidos demonstraram um peso final significativamente maior
(P<0,05, ANOVA seguida pelo teste de Tukey) dos camarões aclimatados na salinidade
mais baixa, com médias (±DP) de peso final iguais a 1,08 g (±0,3) e 0,62 g (±0,15) na
salinidade 30. Estes resultados provavelmente refletem a ação de genes induzidos pela
baixa salinidade que também têm efeito sobre o crescimento. Dando prosseguimento ao
trabalho, os cinco camarões mais leves e os cinco mais pesados de cada repetição foram
imediatamente congelados em nitrogênio líquido para a etapa posterior. Na segunda fase
deste trabalho, foi realizado um estudo de prospecção gênica utilizando os organismos
que apresentaram um crescimento diferenciado, com o objetivo de identificar genes
relacionados com o processo de crescimento e tolerância à salinidade. O método testado
foi uma adaptação da técnica usual de análise da expressão diferencial de genes, através
da transcrição reversa do RNA total seguida pela reação em cadeia da polimerase
(DDRT-PCR). Utilizando-se os tecidos criopreservados dos camarões, foi extraído o
RNA total e produzidos os respectivos DNAs complementares (cDNAs). A partir da
comparação entre os genes transcritos nas duas classes de tamanho, foram identificados
genes com expressão diferencial na comparação entre indivíduos grandes e pequenos.
Dois destes genes, até então desconhecidos para o camarão-rosa (ciclofilina e
hemocianina), foram isolados, clonados, sequenciados e comparados com genes de
v outras espécies armazenados no Banco Mundial de genes (Genbank). Os resultados
obtidos neste estudo demonstram a viabilidade da metodologia utilizada na
identificação de genes relacionados com características importantes para a aqüicultura.
This work evaluated growth and survival of a native penaeid shrimp reared in
different salinities. Groups of 200 PL47 (post-larvae with 47 days old) of
Farfantepenaeus paulensis with average initial weight (±SD) of 0,022 g (±0,008),
produced at Estação Marinha de Aquacultura of Fundação Universidade Federal do Rio
Grande - Brazil, were cultivated along 60 days in 1m3 cages inside two tanks of 20.000
L, with salinities 5 and 30. Salinity levels were considered different treatments, with
three replicates each. Shrimps were fed ad libitum in trays, with a commercial diet
supplied two times at day. Averages (±SD) of temperature, pH, dissolved oxygen and
total ammonia (TAN; NH4 - + NH3) were 25,5 (±1,9); 8,07 (±0,13); 5,16 mg/L (±1,07)
and 0,042 mg/L (±0,013), respectively, values considered acceptable for the species. At
the end of experiment, individually counted shrimps were weighed, presenting a
survival of 97% for both treatments. Results demonstrated a significant increase of
weight (ANOVA; P<0,05) of the shrimps acclimated in low salinity, with averages
(±SD) of final weight 1,08 g (±0,3), and 0,62 g (±0,15) in high salinity. These results
probably reflect the action of genes induced by low salinity that also have an effect on
growth. Continuing the work, five lighter and five heavier shrimps of each replicate
were immediately frozen in liquid nitrogen. In the second phase, a study of gene
prospection was carried out using animals that presented differentiated growth, with
objective of identifying genes related with the processes of growth and salinity
tolerance. An adapted method of differential display reverse transcriptase - polimerase
chain reaction (DDRT-PCR) was used. From criopreserved tissues of shrimps, total
RNA was extracted and complementary DNA produced (cDNA). From the comparison
between transcribed genes of large and small size classes animals, differential expressed
genes were identified. Two of these genes, ciclophilin and hemocyanin, unknown for
the pink shrimp, were isolated, cloned, sequenciated and compared with genes of other
species in GenBank. Results demonstrated the viability of the methodology used to
identify genes with important traces to aquaculture.
