Influência da infecção pelo Nematódeo Toxocara canis sobre a resposta da vacina contra sarampo, caxumba e rubéola em camundongos Swiss

Abstract

O calendário básico vacinal humano contempla a imunização contra o sarampo, caxumba e rubéola a partir dos 12 meses, doenças relevantes pelo seu histórico clínico e epidemiológico. Estudos revelam que os helmintos promovem modulação do sistema imune do hospedeiro, podendo interferir na resposta vacinal e causar prejuízo no estabelecimento da imunidade protetora. O nematódeo intestinal de cães Toxocara canis (T. canis) é o principal agente etiológico da toxocaríase humana, uma zoonose subdiagnosticada e negligenciada mundialmente. Em crianças, estudos de soroprevalência revelam níveis elevados de anticorpos para T. canis. Devido ao fato dos helmintos poderem causar prejuízo no estabelecimento de uma imunidade vacinal eficaz, torna-se relevante estudar a influência da infecção crônica por T. canis na resposta imunológica de vacinas do calendário básico da criança. O presente estudo avaliou se a infecção por T. canis interfere na resposta vacinal de camundongos inoculados com vacina para sarampo, caxumba e rubéola. Foram utilizados 18 camundongos da linhagem Swiss, divididos em três grupos:TxVac (infectados e vacinados), Vac (somente vacinados) e Cont (sem infecção e sem vacina). Para o estabelecimento da infecção crônica, o grupo TxVac foi previamente inoculado com ovos de T. canis. A vacina tríplice viral (Priorix®) foi administrada em duas doses nos camundongos dos grupos TxVac e Vac, sendo a primeira dose 60 dias após a inoculação dos ovos, e a segunda dose 30 dias após a primeira, ambas por via subcutânea, em volume de 50μl. Foram realizadas coletas de sangue nos dias 15, 30, 45 e 60 pós-vacinação (p.v) (1ª dose) para a avaliação do efeito da infecção por T. canis sobre a produção de anticorpos IgG oriundos da vacinação através do teste de ELISA. Ao final do experimento, no dia 60 p.v (1ª dose), foram coletados os esplenócitos de todos os grupos para avaliar a resposta imune celular, através da avaliação da transcrição gênica das citocinas IFNγ, IL12, IL4, IL10 e TGFβ. A infecção por T. canis foi confirmada com a recuperação de larvas no encéfalo, fígado e pulmões dos camundongos infectados por digestão tecidual.A partir dos resultados obtidos, foi possível observar que a infecção por T. canis não alterou os níveis de anticorpos gerados pela vacinação. Entretanto, em relação às citocinas, a infecção por T. canis promoveu uma redução significativa de 12 vezes nos níveis de IL12 e de 3,4 vezes os níveis de IL10. Não foram encontradas diferenças significativas nos níveis de IFNγ e TGFβ entre os grupos TxVac e Vac, embora os níveis de TGFβ tenham sido 5,7 vezes mais elevados nos camundongos não infectados. A vacinação não teve efeito sobre os níveis de IL4, mas a infecção por T. canis resultou em uma redução de 30 vezes nos níveis dessa citocina. Conclui-se que, embora os níveis de anticorpos gerados pela vacina não tenham sofrido alteração nos camundongos com infecção crônica por T. canis, este nematódeo promoveu supressão de citocinas pró e anti inflamatórias nos animais vacinados.

The basic human immunization schedule includes immunization against measles, mumps and rubella from 12 months of age, relevant diseases due to their clinical and epidemiological history. Studies reveal that helminths promote modulation of the host's immune system, which may interfere with the vaccine response and cause damage to the establishment of protective immunity. The intestinal nematode of dogs Toxocara canis (T. canis) is the main etiologic agent of human toxocariasis, an underdiagnosed and neglected zoonosis worldwide. In children, seroprevalence studies reveal elevated levels of antibodies to T. canis. Due to the fact that helminths can impair the establishment of effective vaccine immunity, it becomes relevant to study the influence of T. canis infection on the immune response to vaccines in the child's basic schedule. The present study evaluated whether T. canis chronic infection interferes with the vaccine response of mice inoculated with measles, mumps and rubella vaccine. Eighteen Swiss mice were used, divided into three groups (TxVac, Vac and Cont). For the establishment of chronic infection, the TxVac group was previously inoculated with T. canis eggs. The triple viral vaccine (Priorix®) was administered in two doses to mice in the TxVac and Vac groups, the first dose 60 days after egg inoculation, and the second dose 30 days after the first, both subcutaneously, in volume of 50μl. Blood collections were performed on days 15, 30, 45 and 60 post-vaccination (p.v)(1st dose) to assess the effect of T. canis infection on the production of IgG antibodies resulting from vaccination through the ELISA test. At the end of the experiment, on day 60 p.v. (1st dose), splenocytes were collected from all groups to evaluate the cellular immune response, through the evaluation of the gene transcription of the cytokines IFNγ, IL12, IL4, IL10 and TGFβ. T. canis infection was confirmed with the recovery of larvae in the brain, liver and lungs of infected mice. From the results obtained, it was possible to observe that the infection by T. canis did not alter the levels of antibodies generated by the vaccination. However, regarding cytokines, T. canis infection promoted a significant reduction of 12 times in IL12 levels and 3.4 times in IL10 levels. No significant differences were found in IFNγ and TGFβ levels between the TxVac and Vac groups, although TGFβ levels were 5.7 times higher in uninfected mice. Vaccination had no effect on IL4 levels, but T. canis infection resulted in a 30-fold reduction in IL4 levels. It is concluded that, although the levels of antibodies generated by the vaccine have not changed in mice with chronic infection by T. canis, this nematode promoted suppression of pro and anti-inflammatory cytokines in vaccinated animals.