Avaliação da eficácia de novos extratos vegetais anestésicos e da tricaína para juvenis de Tambaqui Colossoma macropomum (Cuvier, 1818): implicações sobre as respostas de estresse

Abstract

Este trabalho teve por objetivo avaliar a eficácia do óleo essencial (OE) de Nectandra grandiflora Nees, do extrato de Spilanthes acmella var oleracea obtido por técnica de extração por fluido supercrítico com uso de CO2 e da tricaína (MS-222) como anestésicos para juvenis de tambaqui Colossoma macropomum (Cuvier, 1818), além de seus efeitos sobre os parâmetros fisiológicos e de estresse oxidativo nos períodos pós- anestesia e pós-transporte sob sedação. Os peixes (3,3 a 65,74 g) foram aclimatados por 15 dias em sistemas de recirculação e os parâmetros de qualidade de água foram mantidos dentro da faixa de conforto para a espécie. Pelo menos cinco concentrações de extrato de S. acmella, OE de N. grandiflora e tricaína foram testados e as faixas-teste de concentrações foram determinadas através de ensaios preliminares. A concentração de 20 mg L-1 de extrato de S. acmella foi necessária para promover anestesia rápida (tempo de indução < 3 min) e profunda de juvenis de tambaqui (46,6 g) que também foram avaliados no período pós-anestesia quanto às respostas secundárias de estresse durante 72h na recuperação. Alterações fisiológicas transitórias ocorreram principalmente entre 2 até 24 h pós-anestesia com extrato de S. acmella, sendo que todas as variáveis de fisiologia retornaram ao normal ao final de 72 h na recuperação, à exceção das concentrações mais baixas de Na+ sanguíneo que persistiram reduzidas em comparação aos valores de referência. A tricaína mostrou-se eficiente para anestesia rápida e profunda com concentrações a partir de 240 mg L-1 e não foram observadas vantagens claras de seu uso no transporte por até 10 h na concentração de sedação de 20 mg L-1 para atenuação de estresse oxidativo. O OE de N. grandiflora necessitou de concentração de 200 µL L-1 para determinar anestesia profunda, entretanto, não determinou anestesia rápida. O extrato de S. acmella na concentração de 10 mg L-1 foi suficiente para promover anestesia rápida e profunda dos juvenis (3,3 g) submetidos aos banhos anestésicos. Após o transporte por 2, 6 e 10 h na presença ou ausência do OE de N. grandiflora e extrato de S. acmella (30 µL L-1 e 1 mg L-1, respectivamente) tecidos dos juvenis (músculo, fígado, cérebro e brânquias) foram avaliados quanto às respostas de estresse oxidativo através dos seguintes indicadores: capacidade antioxidante total (ACAP), atividade de GST e substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Essas concentrações de sedação de OE de N. grandiflora e de de extrato de S. acmella foram eficazes para o transporte dessa espécie uma vez que proporcionaram proteção contra dano oxidativo principalmente nos músculos e brânquias. Juvenis transportados por 2, 6 e 10 h na presença de extrato de S. acmella (1 mg L-1) e de tricaína (20 mg L-1) não apresentaram diferenças significativas em relação aos animais transportados sem anestésicos quanto às respostas secundárias de estresse no sangue, ao passo que o OE de N. grandiflora na concentração de 30 mg L-1 atenuou essas respostas principalmente pela diminuição ou manutenção dos níveis glicêmicos e manutenção das concentrações normais de Na+ no sangue. Todos os anestésicos utilizados nesse estudo foram eficazes e seguros para promover anestesia profunda com recuperação plena em juvenis de tambaqui. Os extratos das plantas S. acmella e N. grandiflora são recomendáveis para o transporte desta espécie em sacos plásticos por até 10 h, uma vez que houve relativa melhora das respostas secundárias de estresse e o processo de lipoperoxidação nos tecidos foi reduzido na presença dos extratos.

This study aimed to evaluate the efficacy of the essential oil (EO) of Nectandra grandiflora Nees, extract of Spilanthes acmella var oleracea obtained through supercritical fluid extraction methodology with the use of CO2 and tricaine (MS-222) as anaesthetics for juvenile tambaqui Colossoma macropomum (Cuvier, 1818), as well as their impact on physiological balance and oxidative stress after deep anaesthesia and transport with sedation. Fish (3.3 to 65.74 g) were acclimated for 15 days in recirculation systems with daily partial changes of water. Water quality parameters were controlled and adequately maintained for the species. At least five concentrations of S. acmella extract, EO of N. grandiflora and tricaine were tested and concentrations ranges were determined in preliminary tests. The dosage of 20 mg of L-1 of extract of S. acmella was enough to promote fast (induction time within 3 min) and deep anaesthesia in juvenile tambaqui (46.6 g), which were also evaluated for secondary stress responses post-anaesthesia during 72 hours in recovery. Transient physiological changes occurred mainly between 2 and 24 h post-anaesthesia with S. acmella extract and variables returned to normal values after 72 h in recovery, except for the lower concentration of blood Na+ which did not return to normal levels compared to reference values of non- anaesthetized fish. Tricaine efficiently induced fast and deep anaesthesia at 240 mg L-1 and forward and no clear advantages were observed with the use tricaine in transports for up to 10 h at the sedation concentration of 20 mg L-1 for the mitigation of oxidative stress. The EO N. grandiflora required at least 200 µL L-1 to promote deep anaesthesia, however, fast induction was not achieved. The extract of S. acmella at 10 mg L-1 was sufficient to promote fast and deep anaesthesia in juveniles (3.3 g) subjected to the anaesthetic baths. After transport for 2, 6 and 10 h in the presence or absence of EO of N. grandiflora and extract of S. acmella (30 µL L-1 L and 1 mg L-1, respectively) tissues (muscle, liver, brain and gills) were collected and evaluated for oxidative stress responses throught the indicators: total antioxidant capacity (ACAP), GST activity and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). These concentrations of EO N. grandiflora and extract of S. acmella were effective in protecting tissues against oxidative damage mainly in muscle and gills of transported fish. Juvenile transported for 2, 6 and 10 h in the presence of S. acmella extract (1 mg L-1) and tricaine (20 mg L-1) showed no significant changes in secondary stress responses in blood compared to animals transported without anaesthetics, whereas the EO of N. grandiflora at the concentration of 30 mg L-1 maintaining normal blood glucose levels and maintaining normal concentrations of Na+ in blood after transport. All anaesthetics used in this study were effective and safe to promote deep anaesthesia and uneventful recovery in tambaqui. Sedation concentrations of the extracts of N. grandiflora and S. acmella are therefore recommended for juvenile tambaqui transported in plastic bags for up to 10 h since secondary stress responses were attenuated and lipoperoxidation process in tissues was reduced by the presence thereof.