Esporotricose e Sporothrix brasiliensis: ocorrência no estado do Rio Grande do Sul e avaliação do disseleneto de difenila em modelo murino

Abstract

A esporotricose felina e zoonótica causada por Sporothrix brasiliensis apresenta um caráter hiperendêmico e emergente no Brasil. No Rio Grande do Sul (RS), um dos estados com maior número de casos documentados, relatos são oriundos apenas da região sul. A ausência na literatura científica da descrição da esporotricose por S. brasiliensis no restante do estado é um fator preocupante e limitante para o controle da situação epidemiológica. Em adição, a dificuldade de tratamento da esporotricose felina, contribui com disseminação do fungo intra e inter-espécies. Assim, diante da pouca disponibilidade de fármacos antifúngicos e das falhas terapêuticas já reportadas, a busca por novos compostos para auxílio no tratamento da esporotricose é urgente. O disseleneto de difenila [(PhSe)2] é um composto simples, estável e com promissora ação in vitro anti-S. brasiliensis. Sendo assim, o presente estudo teve como objetivo atualizar a situação epidemiológica da esporotricose no estado do RS (artigo/manuscrito 1) e avaliar o potencial terapêutico do (PhSe)2, de forma isolada e em associação com o fármaco de eleição, na esporotricose experimental por S. brasiliensis (artigo/manuscrito 2). Para elaboração do artigo/manuscrito 1 foi avaliada a ocorrência de casos da micose no estado a partir de questionários, bem como foi realizado um levantamento dos casos (animal e humano) da doença na região sul (2017-2021) e região metropolitana (Porto Alegre, 2016-2021). De tal modo pode-se demonstrar a ocorrência da esporotricose felina em todas as macrorregiões de saúde do RS, e salientar o agravamento da situação epidemiológica na região sul e na região metropolitana, comprovando que a mesma não encontra-se restrita, e sim amplamente distribuída por todo RS. Para o artigo/manuscrito 2, foi realizado experimento in vivo a partir da infecção por S. brasiliensis no coxim plantar de camundongos BALB/cJ, e posterior tratamento com três concentrações (1, 5 e 10 mg/kg) do (PhSe)2 e associação entre (PhSe)2 1mg/kg e itraconazol 50 mg/kg (ITZ), utilizando grupos controle (placebo e tratamento com ITZ), no período de 30 dias consecutivos, por via oral. A efetividade dos tratamentos foi determinada por dados clínicos, ensaio de sobrevivência, e avaliações micológica (quantificação da carga fúngica) e histológica (padrão de lesão tecidual). Foi possível demonstrar que o (PhSe)2 1 mg/kg reduziu a carga fúngica de forma semelhante ao ITZ, indicando promissora ação antifúngica do composto na forma isolada. Além disso, o grupo da associação [(PhSe)2+ ITZ] diferenciou-se positivamente do grupo ITZ, apresentando maior redução de carga fúngica bem como melhora dos parâmetros clínicos. Já as doses de 5 e 10 mg/kg de (PhSe)2 indicaram possível toxicidade, culminando na perda de peso, maior mortalidade e agravamento de sinais clínicos. Dosagens menores do (PhSe)2 devem ser consideradas, de forma isolada ou em associação com o ITZ, a fim de evidenciar seu pleno potencial terapêutico. Os dados apresentados na tese embasam e fundamentam o enfrentamento da esporotricose no grave contexto de saúde pública à nível nacional, estadual e municipal, demonstrando a importância e a necessidade da notificação compulsória de casos e de ações robustas em saúde pública a fim de conter a dispersão dessa enfermidade. Destaca-se ainda o pioneirismo na utilização do (PhSe)2, de forma isolada ou em interação ao fármaco de eleição, contra o S. brasiliensis em modelo murino, identificando potenciais dosagens com ação terapêutica e estimulando a busca por novas opções antifúngicas.

Feline and zoonotic sporotrichosis caused by Sporothrix brasiliensis has a hyperendemic and emerging character in Brazil. In Rio Grande do Sul (RS), one of the states with the highest number of documented cases, reports come only from the southern region. The absence in the scientific literature of the description of sporotrichosis by S. brasiliensis in the rest of the state is a worrying and limiting factor for the control of the epidemiological situation. In addition, the difficulty in treating feline sporotrichosis contributes to intra and inter-species dissemination of the fungus. Thus, given the limited availability of antifungal drugs and the therapeutic failures already reported, the search for new compounds to help in the treatment of sporotrichosis is urgent. Diphenyl diselenide [(PhSe)2] is a simple, stable compound with promising in vitro anti-S. brasiliensis. Therefore, the present study aimed to update the epidemiological situation of sporotrichosis in the state of RS (article/manuscript 1) and to evaluate the therapeutic potential of (PhSe)2, alone and its association with the first-choice drug, in experimental sporotrichosis by S. brasiliensis (article/manuscript 2). To prepare the article/manuscript 1, the occurrence of mycosis cases in the state was evaluated through questionnaires, as well as a survey of cases (animal and human) of the disease in the Southern region (2017-2021) and Metropolitan region (Porto Alegre, 2016-2021). In this way, it was demonstrated the occurrence of feline sporotrichosis in all health districts of RS and highlights the worsening of the epidemiological scenery in the Southern region and in the Metropolitan region, proving that it is not restricted, but widely distributed for all RS. For article/manuscript 2, an in vivo experiment was executed from the infection by S. brasiliensis in the footpad of BALB/cJ mice, and subsequent treatment with three concentrations (1, 5 and 10 mg/kg) of (PhSe)2 and association between (PhSe)2 1mg/kg and itraconazole 50 mg/kg (ITZ), using control groups (placebo and treatment with ITZ), for 30 consecutive days, orally. The effectiveness of treatments was determined by clinical data, survival assay, and mycological (quantitation of fungal burden) and histological (pattern of tissue injury) assessments. It was possible to demonstrate that (PhSe)2 1 mg/kg reduced the fungal burden in a similar way to ITZ, indicating a promising antifungal action of the compound in isolated form. In addition, the [(PhSe)2+ ITZ] association group was positively different from the ITZ group, showing greater reduction in fungal load as well as improvement in clinical parameters. On the other hand, doses of 5 and 10 mg/kg of (PhSe)2 indicated possible toxicity, culminating in weight loss, higher mortality, and worsening clinical signs. Lower dosages of (PhSe)2 should be considered, alone or in association with ITZ, to demonstrate its full therapeutic potential. The data presented in the thesis support the fight against sporotrichosis in the serious context of public health at the national, state, and municipal levels, demonstrating the importance and need for compulsory notification of cases and robust public health actions in order to contain the dispersion of this disease. Also noteworthy is the pioneering use of (PhSe)2, alone or in interaction with the firstchoice drug, against S. brasiliensis in a murine model, identifying potential dosages with therapeutic action and stimulating the search for new antifungal options.