Descrição morfológica do sangue, da ontogenia dos órgãos linfóides e análise da expressão de genes relacionados ao sistema imune do linguado Paralichthys orbignyanus

Abstract

Este estudo descreve a ontogenia do sistema imune inato e adaptativo do linguado Paralichthys orbignyanus e analisa a expressão de genes RAG1, CD3, CD4-2 e IL-1β, relacionados ao desenvolvimento do sistema imune em larvas e juvenis de P. orbignyanus, e a morfologia do sangue periférico. A larvicultura foi realizada no Laboratório de Piscicultura Estuarina e Marinha da Universidade Federal do Rio Grande (EMA – FURG). O rim apareceu 1 dia após a eclosão (dae), o timo aos 5 dae e o baço aos 10 dae, com células linfóides observadas em torno dos 25 dae. A expressão do gene RAG1 seguiu o aparecimento do timo, e os níveis de mRNA de CD3 e CD4-2 aumentaram após 30 dae. Um aumento nos níveis da citocina IL-1 foi observado aos 30 dae. O sangue de P. orbignyanus segue basicamente o mesmo padrão de outros vertebrados (eritrócitos, leucócitos e trombócitos). Estes resultados sugerem que, a partir dos 25-30 dae, o sistema imune do linguado pode apresentar memória imunológia, podendo-se utilizar imunoestimulantes e vacinação para melhorar as taxas de sobrevivência durante a larvicultura, bem como o perfil normal das células sanguíneas pode servir de base para a futura análise de condições patológicas.This study aimed to describe the ontogeny of the innate and adaptative immune systems and analyze the expression of immune-related genes during the development of larvae and juvenile Paralichthys orbignyanus, as well as the morphological features of the blood, to improve the cultivation of this species in captivity. Larvae provenient from artifical fertiliation were obtained at the Laboratory of Estuarine and Marine Fish Culture of the Federal University of Rio Grande (EMA – FURG). The kidney was observed at 1 day after hatching (dah), the thymus at 5 dah and the spleen at 10 dah, with lymphoid cells being observed in the animals after 25 dah. The expression of RAG1 proteins followed the appearance of the thymus, and CD3 and CD4-2 mRNA levels increased after 30 dah. An increase in the levels of the cytokine IL-1 was observed at 30 dah. The blood of P. orbignyanus follows the hematological pattern of other vertebrates, with erythrocytes, leucocytes and thrombocytes Theshe results suggest that after 25-30 dah the immune system of this species may present immunological memory and larvae and/or juvenile can be immunostimulated or vaccinated to increase survival in early stages of development, as well as the blood profile being used as a basic information for further pathological analysis.